5 培养基和试剂
5.1 营养琼脂培养基：按GB 4789.28中4.7规定。
5.2 磷酸盐缓冲稀释液：按GB 4789.28中3.22规定。
5.3 生理盐水。
5.4 75％乙醇。
6 检验程序
菌落总数的检验程序如下。
┌─────┐
│ 检 样 │
└─────┘
↓
┌─────────────┐
│ 做成几个适当倍数的稀释液 │
└─────────────┘
↓
┌──────────────┐
│ 选择2～3个适宜稀释度 │
│ 各以1mL分别加入灭菌平皿内 │
└──────────────┘
↓
┌─────────────┐
│ 每皿内加入适量营养琼脂 │
└─────────────┘
36±1℃ ↓ 48±2h
┌─────┐
│ 菌落计数 │
└─────┘
↓
┌──────┐
│ 报 告 │
└──────┘
7 操作步骤
7.1 检样稀释及培养
7.1.1 以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的
灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10
的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8 000～10 000r/min的速度处理1min,
做成1∶10的均匀稀释液。
7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其
他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1∶10
0的稀释液。
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